Utførelse av perfusjonsavlingseksperimenter

For å opprettholde den nødvendige temperaturen på 37 ° C i en perfusjonsavlingsbeholder, brukes en varmeplate (MEDAX-Nagel, Kiel, Tyskland) og et deksel lokk (ikke vist) under utførelse av avlingsforsøk over uker (figur 5, 7). Transporten av avlingsmedium oppnås best ved hjelp av en sakte roterende peristaltisk pumpe (ISMATEC, IPC N8, Wertheim, Tyskland). Den er i stand til å levere justerbare og eksakte pumpehastigheter mellom 0,1 og 5 ml i timen.

På passasjen fra lagringsflasken gjennom perfusjonsavlingsbeholdermediet transporteres det langs en montert vevsbærer for å tilveiebringe inneholdte celler. Den nøyaktige geometriske plasseringen av vevsbæreren i en perfusjonsavlingsbeholder garanterer under transport av medium tilførsel med alltid frisk ernæring og luftveier fra alle sider. Samtidig forhindrer det en ufysiologisk opphopning av metabolske produkter og en overskridelse av parakrine faktorer. For å opprettholde dette kontrollerte miljøet for hele avlingsperioden, samles det metaboliserte mediet i en egen avfallsflaske. I virkeligheten resirkuleres ikke medium.

Bilde 216A | Figur 7: Oppsetting av perfusjonsavling med et epitel inne i en gradient perfusjonsavlingsbeholder. En termoplate holder den ønskede temperaturen på 37 ° C. For å gi luminal- og basalsiden av det inneholdte epitelet næring og luftveier, transporterer to kanaler av en peristaltisk pumpe et rødt og et klart medium med nøyaktig samme hastighet på 1,25 ml / t fra en lagringsflaske (venstre side) til avfallsflaske (høyre side). For eliminering av gassbobler under transport av medium plasseres en gassekspanderingsmodul foran gradientbeholderen. | Tonmaurer / CC BY-SA (https://creativecommons.org/licenses/by-sa/3.0/legalcode) | Page URL : (https://commons.wikimedia.org/wiki/File:Minusheet_Figure_7.jpg) from Wikimedia Commons

Forfatter : Milos Pawlowski

Referanser:

Molekylærbiologiteknikker II

Teknikker for molekylærbiologi V