Klassiske metoder i T-celleforskning

T-celler spiller en viktig rolle i det adaptive immunforsvaret. De er i stand til å orkestrere, regulere og koordinere complex immunresponser. Et bredt utvalg av klinisk relevante aspekter er assosiert med tjenesten eller feilfunksjonen i T-cells : Autoimmune sykdommer, kontroll av virale eller bakterielle patogener, utvikling av kreft eller transplantat versus vertssvar. I løpet av de siste årene har forskjellige metoder (ELISpot Assay, intracellular cytokine farging, sekresjonsanalyse) er utviklet for identifisering av T-celler, men bare hovedhistokompatibilitet complex (MHC) prosedyrer tillater identifikasjon og rensing av antigenspesifikke T-celler uavhengig av deres funksjonelle status.

I prinsippet bruker MHC-prosedyrer T-cellereseptor (TCR) -liganden, som er MHC-peptidet complex, som en fargesonde. MHC samhandler med TCR, som igjen kommer til uttrykk på T-cellene. På grunn av TCR-MHC-interaksjoner har bare en veldig svak affinitet overfor hverandre, kan monomere MHC-epitopkomplekser ikke gi stabil binding. Dette problemet kan løses ved å bruke multimeriserte MHC-epitoper, noe som øker bindingsevnen og definitivt tillater stabil binding. Fluorokromer konjugert til MHC-multimerer kan deretter brukes til å identifisere T-celler ved hjelp av strømningscytometri. I dag kan MHC-molekyler produseres rekombinant sammen med de antigene peptider som er kjent for et raskt voksende antall sykdommer.

Bilde 273A | Brett med en bunke bestående av toppen av en vekt, papirhåndklær, membran av nitrocellulose eller nylon, gel, saltløsning og en glassplate. | Thomasione / Public domain | Page URL : (https://commons.wikimedia.org/wiki/File:Aufbau_Suid-Blot.jpg) from Wikimedia Commons

Bilde 273A | Brett med en bunke bestående av toppen av en vekt, papirhåndklær, membran av nitrocellulose eller nylon, gel, saltløsning og en glassplate. | Thomasione / Public domain | Page URL : (https://commons.wikimedia.org/wiki/File:Aufbau_Suid-Blot.jpg) from Wikimedia Commons

Forfatter : Yavor Mendel

Referanser:

Molekylærbiologiteknikker II

Teknikker for molekylærbiologi VI

Kommentarer